Vad är syftet med den primära antikroppen i en Western blot?
Vad är syftet med den primära antikroppen i en Western blot?

Video: Vad är syftet med den primära antikroppen i en Western blot?

Video: Vad är syftet med den primära antikroppen i en Western blot?
Video: Western Blotting Basics.mp4 2024, Juni
Anonim

Med direktdetekteringsmetoden konjugeras ett enzym- eller fluorofor-konjugerat primär antikropp används för att detektera antigenet av intresse på utplåna . I den indirekta detektionsmetoden är en omärkt primär antikropp används först för att binda till antigenet.

Vad är dessutom primär antikropp i Western blot?

De primär antikropp känner igen och binder epitopen eller den specifika aminosyrasekvensen för proteinet av intresse. Sekundär antikroppar används för western blotting är vanligtvis konjugerade med ett enzym; de vanligaste enzymerna är Horse Radish Peroxidas (HRP) och Alkaline Phosphatase (AP).

Vad gör dessutom den primära antikroppen? Primära antikroppar är immunglobuliner som binder till ett specifikt antigen ( protein , peptid, liten molekyl, etc.) av intresse och är typiskt okonjugerade. En bra primär antikropp känner igen och binder med hög affinitet och specificitet för att rena, detektera och mäta antigenet.

Vad är syftet med en Western blot?

A western blot är en laboratoriemetod som används för att detektera specifika proteinmolekyler bland en blandning av proteiner. Därefter separeras proteinmolekylerna enligt deras storlek med en metod som kallas gelelektrofores. Efter separering överförs proteinerna från gelén till a blotting membran.

Hur används antikroppar vid Western blotting?

Antikroppar är Begagnade för att upptäcka målproteiner på western blot (immunoblot). De antikroppar är konjugerade med fluorescerande eller radioaktiva etiketter eller enzymer som ger en efterföljande reaktion med ett applicerat reagens, vilket leder till en färgning eller emission av ljus, vilket möjliggör detektion.

Rekommenderad: